自噬是細胞利用溶酶體降解途徑進(jìn)行自我吞食的過(guò)程，是細胞在營養不足等壓力情況下維持生存的主要代謝途徑。自噬主要分爲三類，即巨自噬（Macroautophagy）、微自噬（Microautophagy）、分子伴侶介導的自噬（Chaperone-mediated autophagy）。自噬在腫瘤、神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病等多種(zhǒng)疾病中發(fā)揮重要作用。

自噬發(fā)生的過(guò)程如下：

圖一 自噬發(fā)生過(guò)程自噬産品介紹：

1.自噬篩選系統：

GFP-LC3 WT/MT

GFP-LC3-RFP-LC3 MT

Luciferase LC3 WT/Luciferase LC3 MT

圖二 自噬篩選系統

1.自噬檢測系統：

單熒光LC3病毒

pLenti-CMV-EGFP-LC3-PGK-Puro

pLenti-Ubc-EGFP-3FLAG-LC3

pLenti-EF1a-GFP-LC3-PGK-Puro

雙熒光LC3病毒

AdV-mCherry-GFP-LC3：高效感染

LV-mCherry-GFP-LC3：穩定表達

AAV-mCherry-GFP-LC3：在體檢測Western Blot檢測

LC3 I/II、p62：提供LC3、p62抗體檢測

圖三 自噬檢測系統

2.自噬基因過(guò)表達/幹擾慢病毒：

幹擾慢病毒、3個靶點/基因、幹擾效率70%以上

過(guò)表達慢病毒、真核表達載體ORF克隆、對(duì)應檢測抗體圖四 自噬基因操作