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分子蛋白

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質粒轉化

服務介紹:

將(jiāng)外源DNA分子導入到受體細胞中,使之獲得新的遺傳特性的一種(zhǒng)方法。將(jiāng)對(duì)數生長(cháng)期的細菌(受體細胞)經(jīng)理化方法處理後(hòu),細胞膜的通透性發(fā)生暫時(shí)性改變,成(chéng)爲能(néng)允許外源DNA分子進(jìn)入的感受态細胞。進(jìn)入受體細胞的DNA分子通過(guò)複制和表達實現信息的轉移,使受體細胞具有了新的遺傳性狀。

實驗結果展示:

實驗流程:

1. 取一管感受态細胞,置于冰上融解;
2. 將(jiāng)DNA分子加入到感受态細胞的離心管中,輕彈混勻,冰上放置30 min;
3. 42℃水浴熱激30 s,立即取出,置于冰上迅速冷卻3 min;
4. 離心管中加入500 μL LB液體培養基(不含有抗生素),37℃,200 rpm培養1 h;
5. 取适量培養液均勻塗在含有Amp抗生素的LB固體培養基平闆上,37℃培養12~16 h;
6. 在超淨台中挑取LB固體培養基平闆中大小均勻的單克隆于1 mL含有Amp的LB液體培養基中,37℃,200 rpm培養4 h;
7. 取2 μL菌液進(jìn)行PCR驗證,用1%的瓊脂糖凝膠對(duì)PCR産物進(jìn)行電泳檢測。

送樣運輸要求

1. 組織、細胞:-80℃保存,幹冰運輸;
2. 血液:EDTA抗凝管,4℃運輸;
3. DNA:體積≥50μl,濃度≥50 ng/μl,4℃運輸。
 
 

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