背景簡介
外泌體（Exosome）是由包括腫瘤細胞在内的幾乎所有類型的細胞都(dōu)可以産生并釋放的一種(zhǒng)微囊，其内部包裹了DNA，RNA，蛋白等物質。衆多的研究表明，外泌體在血液，乳汁，尿液等體液内傳播，其内容物如miRNA可被其他細胞吞噬，成(chéng)爲細胞間通訊的重要介質。越來越多的證據表明，宿主細胞或腫瘤細胞分泌的外泌體參與了腫瘤發(fā)生、生長(cháng)、侵襲和轉移。 外泌體上述特征和生物學(xué)功能(néng)，使其成(chéng)爲液體活檢領域的重要研究對(duì)象，其所含RNA分子如miRNA，lncRNA，circRNA等是極具應用前景的臨床診斷分子标志物。聯川生物依托豐富的RNA項目經(jīng)驗和領先的生信分析實力，推出了針對(duì)外泌體RNA研究的系統解決方案，將(jiāng)協助科研人員深度開(kāi)展外泌體mRNA、miRNA、lncRNA等的鑒定和功能(néng)分析.
技術優勢
國(guó)内最早的外泌體研究科技服務商，外泌體RNA項目經(jīng)驗豐富
芯片和測序兩(liǎng)大高通量檢測平台，滿足外泌體RNA的不同分析需求
采用更低樣本量和專業外泌體分離試劑盒，更能(néng)勝任外泌體實驗的獨特性
多套外泌體RNA研究方案，滿足外泌體mRNA，lncRNA，miRNA的不同研究需求
技術路線
分析内容
樣本類型
血清（≥2 mL），血漿（≥ 2 mL），細胞上清液（≥ 15 mL），
乳汁（≥10 mL），尿液（≥ 15 mL），無DNA污染的總RNA等
建議總RNA起(qǐ)始量（單次）：≥1 μg，濃度≥ 20 ng/μL （原則上越多越好(hǎo)）
近期用戶文章
1. Gu Y, Li M, Wang T, et al. Lactation-Related MicroRNA Expression Profiles of Porcine Breast Milk Exosomes[J]. Plos One, 2012, 7(8):e43691.
2. Gildea J J, Carlson J M, Schoeffel C D, et al. Urinary exosome miRNome analysis and its applications to salt sensitivity of blood pressure.[J]. Clinical Biochemistry, 2013, 46(12):1131-1134.
3. Yelamanchili S V, Lamberty B G, Rennard D A, et al. MiR-21 in Extracellular Vesicles Leads to Neurotoxicity via TLR7 Signaling in SIV Neurological Disease[J]. Plos Pathogens, 2015, 11(7):e1005032.
4. Song M, Wang Y, Shang Z F, et al. Bystander autophagy mediated by radiation-induced exosomal miR-7-5p in non-targeted human bronchial epithelial cells:[J]. Sci Rep, 2016, 6:3016
Q1：外泌體的提取方法有哪些？
A：外泌體的提取/富集方法有超高速離心，密度梯度離心，流式、磁珠篩選，高分子聚合物等。需要根據樣品類型的不同選擇不同的提取方法，這(zhè)四類提取方法的外泌體産量、純度以及所需樣品量均不同，需要根據實際情況選擇對(duì)應的提取方法。
Q2：如何進(jìn)行外泌體鑒定？
A：外泌體鑒定目前采用的是電鏡和West-blot。典型的外泌體電鏡觀察圖是30-100nm 大小的球形或碗形囊泡。West-blot鑒定時(shí)可以選擇外泌體特異性蛋白做 West-blot 鑒定。 WB 可以選擇最多的蛋白一般是和 MVBs 合成(chéng)相關的蛋白（Alix、 TSG101）及四次跨膜蛋白（CD9, CD63,CD81, CD82），同時(shí) WB 時(shí)能(néng)做 non exosome marker 最好(hǎo)，比如，GRP94, EEA1,Cytochrome c, GM130, PMP70, Calreticulin, prohibitin 等，這(zhè)些蛋白都(dōu)是 exosome 沒(méi)
有，細胞總蛋白中才有。
非靶向(xiàng)人類支氣管上皮細胞旁自噬由輻射誘導的外泌體miR-7-5p介導
研究背景
輻射誘導的旁效應（RIBE）描述了一組非靶向(xiàng)細胞接收輻照細胞旁信号的生物學(xué)效應。在放射治療中，RIBE會(huì)給癌旁正常組織帶來潛在危害，具有比預想更高的風險。從輻照細胞到細胞外微環境，某些物質的過(guò)量釋放會(huì)造成(chéng)有害的影響。例如，細胞因子和活性氧已被證實通過(guò)細胞外介質或縫隙連接參與RIBE過(guò)程。然而，RIBE介導的信号和細胞間信息通路尚不完全清楚。
研究結果
在這(zhè)項研究中，運用miRNA微流體芯片對(duì)外泌體miRNA進(jìn)行了差異表達譜分析。研究人員首次從受2Gy γ射線照射的人支氣管上皮BEP2D細胞的外泌體中鑒定出一組差異表達的miRNA。其中，外泌體中的miR-7-5p被發(fā)現誘導受體細胞自噬。外泌體介導的自噬明顯被miR-7-5p抑制劑減弱。此外，我們的數據表明，由外泌體miR-7-5p誘導的自噬與EGFR PI3K/AKT/mTOR信号通路相關。同時(shí)，研究結果支持外泌體參與RIBE信号傳播到旁細胞的過(guò)程。其中外泌體miR-7-5p是旁自噬的重要介質。
圖 受體BEP2D細胞通過(guò)外泌體miR-7-5p誘導旁自噬
參考文獻
Song M, Wang Y, Shang ZF, Liu XD, Xie DF, Wang Q, Guan H, Zhou PK. (2016) Bystander autophagy mediated by radiation-induced exosomal miR-7-5p in non-targeted human bronchial epithelial cells. Scientific Reports. 6:30165.
