RNA pull-down實驗是檢測與目的RNA結合的蛋白質。使用體外轉錄法标記生物素RNA探針,然後(hòu)與胞漿蛋白提取液孵育,形成(chéng)RNA-蛋白質複合物。該複合物可與鏈黴親和素标記的磁珠結合,從而與孵育液中的其他成(chéng)分分離。複合物洗脫後(hòu),通過(guò)western blot實驗檢測特定的RNA結合蛋白是否與RNA相互作用。
1. 質粒轉化、塗闆、搖菌
2. 質粒中提
3. 質粒線性化
4. 瓊脂糖凝膠電泳、切膠回收
5. 轉錄以及生物素标記、檢測
1. 蛋白質、組織、細胞:-80℃保存,幹冰運輸;
2. 血液:EDTA抗凝管,4℃運輸。