膜片鉗技術(patch clamp recording technique)。這(zhè)是一種(zhǒng)以記錄通過(guò)離子通道(dào)的離子電流來反映細胞膜單一的或多個的離子通道(dào)分子活動的技術。它和基因克隆技術(gene cloning)并架齊驅,給生命科學(xué)研究帶來了巨大的前進(jìn)動力。
1. 微電極的制備
2. 細胞标本的制備
3. 高阻封接的的形成(chéng)
4. 離子單通道(dào)電流的記錄或全細胞記錄
1. 貼壁細胞:用胰酶將(jiāng)細胞消化下來,或用細胞刮將(jiāng)細胞刮下來,將(jiāng)培養液在室溫條件下1000轉/分,離心10分鍾,棄上清留細胞沉澱,幹冰運輸。
2. 懸浮細胞:將(jiāng)培養液1000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉澱,幹冰運輸。
3. 細胞上清:3000轉/分,離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝後(hòu)于-20℃或-80℃保存。避免反複凍融。