免疫電鏡檢查(immunoeletron microscopy,IEM)是免疫組織化學(xué)技術與透射電鏡技術相結合,在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種(zhǒng)方法。利用帶有特殊标記的抗體與抗原結合,根據标準物形成(chéng)一定的電子密度而指示出相應抗原所在的部位,能(néng)夠對(duì)未知抗原進(jìn)行早期的診斷。
FA+GA固定→切片→免疫标記及染色→透射電鏡觀察→拍照
以下所有樣本必須盡量新鮮,固定液或懸浮液都(dōu)不得冷凍結冰!
1. 電鏡檢測取材較爲嚴格,取材需要迅速,材料塊要小,固定液和材料比例爲10:1。使用4%多聚甲醛加少量新鮮配制的戊二醛固定,使其終濃度爲0.5%~1%。4℃保存或冰浴(條件允許,推薦)運輸至我方。
2. 外秘體囊泡等用緩沖液(如PBS)或者試劑盒中的保存液懸浮,遠距離-80℃凍存運輸,近距離4℃保存運輸,盡快制片及時(shí)電鏡觀察拍照。
注:將(jiāng)所取樣本盡可能(néng)固定在生活狀态下,并保存樣本的抗原活性;免疫電鏡由于GA濃度很低微細結構變化大,2h或過(guò)夜中間換液2~3次。