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動物實驗

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HPLC樣本檢測及方法開(kāi)發(fā)

服務介紹:

高效液相色譜,是液體樣本被壓力注入色譜柱,通過(guò)分析物與固定相相互作用不同,不同物質按照順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測器得到不同信号,具有高分離度,高重複性的優勢。液相色譜在藥物研發(fā),環境分析,食品分析,臨床醫學(xué)等領域廣泛應用,可完成(chéng)純度測定,複雜生物樣品中分析物含量測定等。方法學(xué)開(kāi)發(fā)的目的就(jiù)是在熱力學(xué)和動力學(xué)之間找到分析物的平衡點,以期來更好(hǎo)對(duì)樣品中分析組分進(jìn)行分離,相互定量不産生幹擾。

主要設備:色譜儀 Agilent 1260 infinity Ⅱ

實驗結果展示:

方法開(kāi)發(fā):

①含真實樣本的方法開(kāi)發(fā):報告提供方法檢測下限,線性範圍(根據真實樣本調整),樣品檢測結果,詳細色譜條件,不做多基質條件的摸索;②不含真實樣本的方法開(kāi)發(fā):已經(jīng)完成(chéng)方法開(kāi)發(fā),有成(chéng)熟的方法-樣本前處理-上機檢測報告提供方法檢測下限,上下限的倍數關系,詳細色譜條件,不做基質條件的摸索。

實驗流程:

标準品測量配制→标品預試→樣品上機預試→調整儀器參數→驗證線性倍數→驗證基質幹擾→完成(chéng)方法開(kāi)發(fā)→樣本前處理→上機檢測

送樣運輸要求:

1、細胞樣本
①細胞量1×107個,收集細胞沉澱,-80℃保存,純幹冰運輸,避免反複凍融。
②收集時(shí),用預冷PBS緩沖液清洗三次,去除培養基成(chéng)分,然後(hòu)離心去除上清保存。
③如需要進(jìn)行細胞計數,則需送樣前進(jìn)行。
2、全血樣本
①樣本量200 μL,EDTA、EDTA-K2或肝素鈉抗凝,4℃保存,冰袋運輸,避免劇烈振蕩和冷凍結冰。
②由于全血常規保存期爲7天,如需檢測,需要提前至少1周聯系實驗室确認周期情況,以便溝通協調安排檢測。
3、血清、血漿樣本
①樣本量100 μL,-80℃保存,純幹冰運輸,避免反複凍融及溶血。
4、尿液樣本
①樣本量200 μL,-80℃保存,純幹冰運輸,避免反複凍融及帶入糞便殘渣。
5、動物組織樣本
①樣本量300 mg,-80℃保存,純幹冰運輸,避免反複凍融。
②收集時(shí),用預冷PBS緩沖液沖洗表面(miàn)血液,并用濾紙吸幹多餘水分,避免凍存時(shí)結冰。
③固定液浸泡過(guò)的樣本無法進(jìn)行檢測。
6、植物組織樣本
①樣本量500 mg,-80℃保存,純幹冰運輸,避免反複凍融。
②收集時(shí),用預冷PBS緩沖液沖洗表面(miàn)泥沙,并用濾紙吸幹多餘水分,避免凍存時(shí)結冰。
③固定液浸泡過(guò)的樣本無法進(jìn)行檢測。
 

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