甲基化特異性的PCR技術((methylation-specific PCR, MSP)是在亞硫酸鹽處理基因組DNA後(hòu),所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶(C)被轉化爲尿嘧啶(U)而甲基化的胞嘧啶則不變,設計兩(liǎng)對(duì)引物,即一對(duì)擴增甲基化DNA鏈(引物對(duì)M),另一對(duì)擴增非甲基化DNA鏈(引物對(duì)U),電泳檢測引物M和U是否擴增成(chéng)功,來判斷某個基因的甲基化情況。
DNA抽提→亞硫酸氫鹽處理→引物設計及擴增→挑選克隆測序→數據分析
1. 組織、細胞:-80℃保存,幹冰運輸;
2. 血液:EDTA抗凝管,4℃運輸;
3. DNA:體積≥50μl,濃度≥50 ng/μl,4℃運輸。