microRNA(簡稱miRNA)的長(cháng)度比較短,通常是20nt到24nt長(cháng)度,因此用常規的qPCR法很難對(duì)其直接定量。現在常用的對(duì)miRNA的定量方法主要有三種(zhǒng),分别爲加尾法,莖環引物法,探針法。
QPCR驗證miRNA在下咽癌腫瘤和粘膜組織中的表達
引物設計→取材→RNA提取逆轉錄成(chéng)cDNA→實時(shí)熒光定量PCR-(QPCR産物電泳)→數據分析
1. 組織、細胞: -80℃保存、幹冰運輸;
2. 血液:EDTA抗凝管,4℃運輸;
3. RNA樣本:體積≥10 μL,幹冰運輸。