用免疫磁珠做細胞分選(MACS)是高效簡捷的免疫細胞及其它細胞的分離純化方法。原理是已包被一抗的磁珠與細胞表面(miàn)相應分子 特異性結合,或者已包被二抗(羊抗小鼠或羊抗大鼠)的磁珠與預先已與細胞表面(miàn)分子特異結合的一抗結合。磁珠攜帶與之結合的細胞吸附于分離柱/試管上,實現陽性細胞分離或陰性細胞的分離。
1. 離心收集待分離細胞,用少量PBE孵育液充分混懸細胞,加入一抗,4℃孵育30分鍾。
2. 用20倍體積PBE洗細胞一次,再加PBE充分混懸細胞後(hòu),加入相應二抗包被的超微磁珠,混勻後(hòu)置8~15℃孵育10~15分鍾。
3. 將(jiāng)分離柱安裝入磁場中,加入0.5ml PBE,在重力作用下自然流盡,以預處理分離柱。