過(guò)表達穩定細胞系是將(jiāng)靶DNA克隆到具有某種(zhǒng)抗性或選擇基因的載體上，載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主基因組中，使外源基因在宿主細胞中長(cháng)期穩定表達。
1. 引物設計與目的片段的擴增
2. 目的片段與慢病毒載體質粒連接，連接産物轉化感受态細胞，挑取單克隆菌落，提取進(jìn)行檢測目标基因。
3. 慢病毒表達載體轉染細胞，培養48小時(shí)後(hòu)，收集細胞上清，測定病毒滴度。
4. 抗生素篩選穩定細胞株。
5. qPCR或WB檢測目的基因的表達。
