免疫熒光是根據抗原抗體反應的原理,先將(jiāng)已知的抗原或抗體标記上熒光素制成(chéng)熒光标記物,再用這(zhè)種(zhǒng)熒光抗體(或抗原)作爲分子探針檢查細胞或組織内的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成(chéng)的抗原抗體複合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察标本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而确定抗原或抗體的性質、定位,以及利用定量技術測定含量。
小鼠胰腺-免疫熒光(雙标)
石蠟切片脫蠟至水→抗原修複→5%羊血清封閉→加一抗→加二抗→DAPI封片→熒光顯微鏡下觀察,照片采集
1.樣本放置于25倍樣本體積的固定液中固定至少24 h(切勿固定時(shí)間過(guò)長(cháng),切勿冷凍結冰),常溫運輸送樣。
2.石蠟切片常溫運輸,冰凍切片-20℃運輸。
3、細胞爬片用固定液浸泡,4℃保存和運輸