根據抗原抗體反應和化學(xué)顯色原理,組織切片或細胞标本中的抗原先和一抗結合,再利用一抗與标記生物素等的二抗進(jìn)行反應,再用标記辣根過(guò)氧化物酶(HRP)等的抗生物素結合,最後(hòu)通過(guò)呈色反應來顯示細胞或組織中化學(xué)成(chéng)分,在光學(xué)顯微鏡下可清晰看見組織細胞内發(fā)生的抗原抗體反應産物,從而能(néng)夠在細胞爬片或組織切片上原位确定某些化學(xué)成(chéng)分的分布和含量。
人浸潤性乳腺癌組織免疫組化
1 石蠟切片脫蠟至水→抗原修複→3%H2O2溶液封閉内源性過(guò)氧化物酶→5%羊血清封閉→加一抗→加聚合物輔助劑→加山羊抗兔/小鼠種(zhǒng)屬通用型二抗→DAB顯色→蘇木素複染→脫水透明封片→顯微鏡鏡檢,圖像采集
1、樣本放置于25倍樣本體積的固定液中固定至少24h(切勿固定時(shí)間過(guò)長(cháng),切勿冷凍結冰),常溫運輸送樣。
2、石蠟切片常溫運輸,冰凍切片-20℃運輸。
3、細胞爬片用固定液浸泡,4℃保存和運輸